細胞培養條件控制

1、溫度

溫度過低時細胞生長緩慢甚至不生長。利用冷凍保藏細胞可保持細胞的原有分裂分化能力。溫度過高導致細胞死亡。這主要是由酶和蛋白質所需要的最適溫度決定的。多數生物大分子遇到高溫後容易導致空間結構改變或者喪失（變性）。細胞膜遇到高溫後容易變態。在自然界，即有耐高溫的細胞，也有耐低溫的細胞。在極端情況下生長的生物對付極端環境的機制研究在生物進化和農業、環保、發酵工業中意義重大。

2、pH

過酸或過鹼可導致細胞死亡。這主要與蛋白質的變性和細胞膜的結構受損有關。

3、滲透壓

細胞內外可溶於水的物質比例和種類決定細胞的膨脹與收縮程度，因為細胞膜是半透膜，只允許對自己有利的物質通過。同一物質在細胞內外的分布的數量不同，當某一種極溶於水的物質在細胞外濃度過大時，有可能導致細胞乾癟死亡，這些物質在細胞內過多時導致細胞過量吸水膨脹。細胞膜調節滲透壓的能力是有限的。

4、營養物

營養物和水一起，又叫細胞培養液，培養液中含有細胞增殖和生長所需要的各種物質。營養物包括：N 源、C源，這些物質與提供能量有關；無機鹽、維生素、激素，這些物質與代謝調節控制有關。細胞培養液的設計一直是細胞離體培養技術的關鍵。理想的細胞培養液可以同時解決細胞離體培養所需要的pH、滲透壓、營養物、調節物質的全部需要。在幹細胞分化研究與應用中，關鍵是找到一種使幹細胞分化成為所需細胞和組織的營養液。相同的人幹細胞，放在不同的營養液中分化培養出人的各種臟器，這個昔日的夢想已經開始成為現實。植物細胞的組織培養技術已經基本完善配套。名貴花卉、中草藥、脫毒馬鈴薯、組織培養蓮菜苗等植物細胞與組織培養技術的不斷完善，特別是由於組織培養液的商品化已經被廣大農民普遍接受。

5、水

水是細胞需要數量最大的物質，不同的物種、不同部位、不同生長期的細胞含水量差別相當大。乾旱植物細胞的含水量高達90%。水的需求量一般隨同細胞培養液一起考慮。

6、無菌條件

體外細胞培養僅僅是對所需的細胞進行培養，但環境中（如空氣）有各種其他微生物，必須對所需細胞進行無雜菌的隔離培養。無菌條件是細胞離體培養最基本的條件。

7、光

植物細胞和少數細菌需要利用光進行光合作用。

8、氣體

動物細胞需要不斷供給氧氣和排除二氧化碳，植物細胞與此相反。

動物細胞培養條件

(1)血清：動物細胞離體培養常常需要血清。最常用的是小牛血清和胎牛血清。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質和脂肪。有一天人們真正學會了配製和血清一樣的培養液，那時血清才可被取代。在這裡，血清等於是動物細胞離體培養的天然營養液。

(2)支持物：大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用玻璃，塑料等作為支持物。

(3)氣體交換：二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養過程中不斷進行調節，不斷維持所需要的氣體條件。

注意事項：

1、CO2培養箱可以提供給細胞生長所需的溫度及氣體條件（一般為37℃，5% CO2），在開關門的時候CO2降低的速度非常快，冬天溫度降低也很快，會對裡面的細胞造成損傷，所以開關門一定要迅速。

細胞不在CO2培養箱時也要儘量保證其生存條件，如進行換液時所用的完全培養基等細胞接觸的液體提前放置於37℃水浴鍋中升溫至37℃，細胞在外界停留的時間儘量縮短等。

2、如果需要特殊的溫度及氣體環境，如低氧、高氧等，我們是實驗室無法滿足，請另想辦法。

3、購置的細胞株，在購置時問好培養所需的條件、培養基和血清及其它添加物。不同的細胞株在培養時有不同的要求。