细胞培养条件控制

1、温度

温度过低时细胞生长缓慢甚至不生长。利用冷冻保藏细胞可保持细胞的原有分裂分化能力。温度过高导致细胞死亡。这主要是由酶和蛋白质所需要的最适温度决定的。多数生物大分子遇到高温后容易导致空间结构改变或者丧失（变性）。细胞膜遇到高温后容易变态。在自然界，即有耐高温的细胞，也有耐低温的细胞。在极端情况下生长的生物对付极端环境的机制研究在生物进化和农业、环保、发酵工业中意义重大。

2、pH

过酸或过碱可导致细胞死亡。这主要与蛋白质的变性和细胞膜的结构受损有关。

3、渗透压

细胞内外可溶于水的物质比例和种类决定细胞的膨胀与收缩程度，因为细胞膜是半透膜，只允许对自己有利的物质通过。同一物质在细胞内外的分布的数量不同，当某一种极溶于水的物质在细胞外浓度过大时，有可能导致细胞干瘪死亡，这些物质在细胞内过多时导致细胞过量吸水膨胀。细胞膜调节渗透压的能力是有限的。

4、营养物

营养物和水一起，又叫细胞培养液，培养液中含有细胞增殖和生长所需要的各种物质。营养物包括：N 源、C源，这些物质与提供能量有关；无机盐、维生素、激素，这些物质与代谢调节控制有关。细胞培养液的设计一直是细胞离体培养技术的关键。理想的细胞培养液可以同时解决细胞离体培养所需要的pH、渗透压、营养物、调节物质的全部需要。在干细胞分化研究与应用中，关键是找到一种使干细胞分化成为所需细胞和组织的营养液。相同的人干细胞，放在不同的营养液中分化培养出人的各种脏器，这个昔日的梦想已经开始成为现实。植物细胞的组织培养技术已经基本完善配套。名贵花卉、中草药、脱毒马铃薯、组织培养莲菜苗等植物细胞与组织培养技术的不断完善，特别是由于组织培养液的商品化已经被广大农民普遍接受。

5、水

水是细胞需要数量最大的物质，不同的物种、不同部位、不同生长期的细胞含水量差别相当大。干旱植物细胞的含水量高达90%。水的需求量一般随同细胞培养液一起考虑。

6、无菌条件

体外细胞培养仅仅是对所需的细胞进行培养，但环境中（如空气）有各种其他微生物，必须对所需细胞进行无杂菌的隔离培养。无菌条件是细胞离体培养最基本的条件。

7、光

植物细胞和少数细菌需要利用光进行光合作用。

8、气体

动物细胞需要不断供给氧气和排除二氧化碳，植物细胞与此相反。

动物细胞培养条件

(1)血清：动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清和胎牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。有一天人们真正学会了配制和血清一样的培养液，那时血清才可被取代。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。

(2)支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃，塑料等作为支持物。

(3)气体交换：二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节，不断维持所需要的气体条件。

注意事项：

1、CO2培养箱可以提供给细胞生长所需的温度及气体条件（一般为37℃，5% CO2），在开关门的时候CO2降低的速度非常快，冬天温度降低也很快，会对里面的细胞造成损伤，所以开关门一定要迅速。

细胞不在CO2培养箱时也要尽量保证其生存条件，如进行换液时所用的完全培养基等细胞接触的液体提前放置于37℃水浴锅中升温至37℃，细胞在外界停留的时间尽量缩短等。

2、如果需要特殊的温度及气体环境，如低氧、高氧等，我们是实验室无法满足，请另想办法。

3、购置的细胞株，在购置时问好培养所需的条件、培养基和血清及其它添加物。不同的细胞株在培养时有不同的要求。