Western Blot 檢測

Western Blot即蛋白質免疫印跡法，也稱Western、Western blotting、Western印跡，常簡寫為WB，是將電泳分離後的細胞或組織總蛋白質從聚丙烯酰胺凝膠轉移到固相支持物PVDF或NC膜膜上，然後用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質檢測技術，現已廣泛應用於基因在蛋白水平的表達研究、抗體活性檢測和疾病早期診斷等多個方面。

Western Blot採用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，「探針」是抗體，「顯色」用標記的二抗。經過聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)分離的蛋白質樣品，通過轉膜方式轉移到固相載體(如PVDF、NC膜)上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶標記(通常是HRP)的第二抗體起反應，經過底物化學發光試劑(如ECL)發光或顯示試劑(如DAB)顯色以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。