Western Blot 检测

Western Blot即蛋白质免疫印迹法，也称Western、Western blotting、Western印迹，常简写为WB，是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶转移到固相支持物PVDF或NC膜膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。

Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离的蛋白质样品，通过转膜方式转移到固相载体(如PVDF、NC膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记(通常是HRP)的第二抗体起反应，经过底物化学发光试剂(如ECL)发光或显示试剂(如DAB)显色以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。