培养细胞的常规观察

培养细胞在体外的生长过程是一个动态的连续过程，细胞的数目、形态以及培养基的颜色、澄明度等在一定程度上都是细胞生长状况的表现。借助于肉眼或显微镜的帮助，通过对上述常规指标的观察，可以有效地帮助我们及时把握细胞的生长信息，适时、适当采取相关措施培养好细胞。
（一）培养基的观察
培养基的颜色和澄明度是肉眼观察的两个重要指标。新鲜的培养基一般呈现桃红色，pH约为7.2～7.4，培养过细胞后的培养基由于含有大量细胞代谢产物而使得pH降低，颜色也逐渐变黄。培养基颜色的这种变化是由其所含有的酚红指示剂来显示的，酚红会随溶液的pH变化而改变颜色，成为指示培养基pH的最直观指标。培养基颜色变黄是细胞需要更换培养液的信号。一般情况下，大多数细胞需要每2～3天换液一次。需要注意的是，如果细胞在换液或传代后培养液很快就会变黄，这可能是细菌污染或培养瓶不干净造成的。
正常情况下，无论颜色如何变化，培养基都能保持澄明。一旦发现培养基变混浊，就应注意是否有污染发生。上述情况多适用于贴壁生长的细胞，对于悬浮生长的细胞来说，随着细胞密度的升高，培养基也会在一定程度上变浑，判断其是否污染应结合溶液颜色变黄的速度、细胞增殖的速度、显微镜下是否可观察到污染以及其他一些方法进行判断。
（二）显微镜检查
利用光的衍射与干涉原理制造的相差显微镜是观察透明活细胞的最佳工具，可以清晰地帮助我们看到生活状态下细胞的形态结构特点，并动态观察和记录细胞的附着、贴壁、伸展、移动、分裂等过程。
在不具备相差显微镜的实验室，普通的倒置显微镜也不失为一种好的观察工具。生长状况良好的细胞在倒置显微镜下观察时较为明亮、折光性也强，细胞的轮廓不清但形态规则。生长状况不佳的细胞在倒置显微镜下观察时折光性变弱、轮廓变得清晰，细胞形态也变得不规则，细胞间的间隙变大，细胞中常出现颗粒样物质，情况更严重时，还可见到脱落死亡的细胞增多。