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细胞培养用器械的清洗和消毒

(一)玻璃器械清洗消毒:
一)新玻璃器皿的清洗消毒:
1.自来水刷洗,除去灰尘。
2.烘干、泡盐酸:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀盐酸中12h以除去脏物、铅、砷等物。
3.刷洗、烘干:12h后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干。
4.泡酸、清洗:用清洁液(即酸液:重铬酸钾120g:浓硫酸200ml:蒸馏水1000ml)浸泡12h,然后从酸缸中捞出器皿用自来水冲洗15次,最后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。
5.烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。
6.高压消毒20-30min,烘干。
二)旧玻璃器皿的清洗消毒:
1.刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。
2.泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12h后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。
3.烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装,以便于消毒储存及防止灰尘和再次被污染。
4.高压消毒20-30min,烘干备用。
(二)金属器械洗消
金属器皿不能泡酸,洗消时可先用洗涤剂刷洗,后用自来水冲干净,然后用75%酒精擦拭,再用自来水,蒸馏水冲洗,烘干或空气中晾干。放入铝制盒内包装好高压消毒30min,烘干备用。
(三)橡胶和塑料
橡胶和塑料制品通常处理方法是:先用洗涤剂洗刷干净,再分别用自来水和蒸馏水冲干净,烤箱烘干,然后根据不同品质进行如下的处理程序:

  1. 针式滤器帽不能泡酸液,用NaOH泡6-12h或者煮沸20min,在包装之前要装好滤膜两张,安装滤膜时注意光面朝上(凹向上),然后将螺旋稍微拧松一些,放入铝盒中在高压消毒30min,再烘干备用。注意在超净台内取出使用时应该立即将螺旋旋紧。
  2. 胶塞烘干后用2%NaOH溶液煮沸30min(用过的胶塞只要用沸水处理30min),自来水洗净,烘干。然后再泡入盐酸液30min,再用自来水,蒸馏水,三蒸水洗净,烘干。最后装入铝盒内高压消毒,烘干备用。
  3. 胶帽,离心管帽烘干后只能在2%氢氧化钠溶液中浸泡6-12h,自来水洗净,烘干。然后再泡入盐酸液30min,再用自来水,蒸馏水,三蒸水洗净,烘干。最后装入铝盒内高压消毒,烘干备用。
  4. 胶头可用75%酒精浸泡5min,然后紫外照射后使用即可。
  5. 其他消毒方法:有的物品既不能干燥消毒,又不能蒸气消毒,可用75%酒精浸泡消毒。塑料培养皿打开盖子,放在超净台台面上,直接暴露在紫外线下消毒。

为了防止清洗器材已消毒与末消毒发生混淆,可在纸包装后作好标记。
(四)注意事项

  1. 严格执行高压锅的操作规程:高压消毒时,先检查锅内是否有蒸馏水,以防高压时烧干,水不能过多因为其将使空气流畅受阻,会降低高压消毒效果。检查安全阀是否通畅,以防高压时爆炸。
  2. 安装滤膜时注意光面朝上:注意滤膜光滑一面是正面,要朝上,否则起不到过滤的作用。
  3. 注意人体的防护和器皿的完全浸泡:A.泡酸时要戴耐酸手套,防止酸液溅起伤害人体。B.从酸缸内捞取器皿时防止酸液溅到地面,会腐蚀地面。C.器皿浸入酸液中要完全,不能留有气泡,以防止泡酸不彻底。