细胞生长曲线的绘制

生长曲线是测定细胞生长基本规律的重要指标，常通过每日或隔日连续计数细胞来绘制。广泛用于比较和评价各种药物、营养条件对细胞生长的影响。
（一）仪器、用品与试剂
超净工作台、细胞培养箱、显微镜、血细胞计数板、培养板或培养瓶、微量加样器、细胞培养基（如添加有10％ FBS的RPMI 1640）、添加有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化液、0.4%台酚兰溶液等。
（二）操作步骤
1．取旺盛生长（对数期）的细胞，经胰蛋白酶消化、洗涤、计数后，以一定密度准确接种在不同组别的培养瓶或培养板中。
2．每隔24h或48h，取样3瓶（孔）细胞消化后用血细胞计数板计数细胞密度，结果取其均值。连续计数7-10天。
3．以培养时间为横坐标，细胞密度为纵坐标绘制生长曲线。
（三）注意事项
1．接种细胞的密度取决于细胞的生长特性和培养时间的长短。通常，所接种的细胞密度不宜太大，否则细胞很快就会进入增殖稳定期，短期内就的进行传代，所得曲线不能准确反映细胞的生长情况。
2．一般需在培养3～5天后给为计数的细胞统一进行换液。
3．生长曲线作为一种常规方法的缺陷是数值不够精确，对细胞生长规律的准确评价需结合其他方法进行，利用MTT法测定生长曲线就是一种较好的选择。